生理生化指标檢測服務
2020-12-12 09:12
生理生化檢測服務提供人，小鼠，大鼠，兔，植物等多個物種的多種生理生化指标檢測。詳情聯系。
Elisa檢測方法作爲生理生化指标檢測的主要方法，針對不同樣本的處理方案如下：
ELISA實驗的樣本準備
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集後當天就進行檢測的樣本，及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本，及時分裝後凍存在-20℃備用，有條件的，最好-70℃凍存備用。标本應避免反複凍融。
液體類标本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20分鍾後，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
2. 血漿：
根據标本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作爲抗凝劑，混合10-20分鍾後，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
3. 尿液：
用無菌管收集。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
5. 培養細胞
檢測細胞内的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞内成份。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
6. 組織标本
切割标本後，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。标本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器将标本勻漿化。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝後一份待檢測，其餘冷凍備用。
7.土壤
直接用PBS提取就是跟組織勻漿一樣，提取1g土壤，加9ml的勻漿液
比例爲1:9
8.糞便
一般稱取重量爲1g左右（不少于50mg）然後按照10%的比例進行勻漿處理，離心提取上清液即可。10%的比例即爲1g糞便樣本加9ml的勻漿液，勻漿液選取的是生理鹽水或者PBS緩沖液（pbs濃度爲0.01mol，PH=7.4）
9.植物組織勻漿處理原則
植物組織要保持新鮮，植物組織重量不少于50mg，勻漿比例按照10%，即1g組織加9ml勻漿液，勻漿液選取磷酸鹽緩沖液，緩沖爲PBS(ph7.2-7.4)濃度爲0.01mol/L。
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